多克隆抗體具備哪些優勢呢
發布時間:2022-02-23 點擊次數:499次
多克隆抗體制備的主要流程包括:制備抗原;選擇實驗動物;動物免疫;試取血進行測試,看看是否成功免疫;如果成功免疫,處死實驗動物,采集全部血清;純化出抗體;鑒定抗體,包括純度以及特異性。
與單抗制備的區別經過特定抗原處理過的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞通過細胞融合的方法得到雜交瘤細胞,經HAT培養基篩選、ELISA檢測效價后就得到陽性克隆株,Zui后進行細胞培養或將細胞注入到動物腹腔中用腹水培養,收集上清/腹水純化后就能得到單克隆抗體。而制備多克隆抗體就沒有單克隆抗體繁瑣,只需將抗原直接注入到動物體內進行免疫,經過3至4次免疫,ELISA測其效價合格后,收集血液離心得到上清,純化后即能得到多克隆抗體。因此多抗制備的周期就比單抗制備的短,*制備價格也比單抗要低。
多克隆抗體是由免疫的宿主通過不同來源(多克隆)的B細胞分泌產生的抗體。一組多克隆抗體應識別同一抗原,同時由于是多克隆,所以往往對同一抗原的多個不同表位進行識別。
優勢:
1、由于多克隆抗體具有多個表位結合位點,可與靶蛋白的多個表位結合,所以,多克隆抗體有助于放大低表達水平的靶蛋白信號,但是,從結果的準確性來說,這個優勢也是劣勢,它會給定量實驗造成不利影響,使結果變得不準確。
2、由于能識別多個表位,多克隆抗體更適用于IP/ChIP實驗,可得到更好的結果。
3、制備生產時間短,所需技術和技能要求不高,成本比單克隆抗體低,穩定性強。
4、雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體選擇多克隆抗體,可以快速捕獲靶蛋白。