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小鼠IgA類單克隆抗體腹水純化試劑盒的誤差怎么減少
發布時間:2022-05-23 點擊次數:397次
如今檢測小鼠IgA類單克隆抗體腹水純化試劑盒有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶,而反應體系中添加有相應的底物。這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。此外結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。
今天教您如何才能減少小鼠IgA類單克隆抗體腹水純化試劑盒誤差:
1:檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質和實踐經驗。能熟練操作實驗儀器、器械,具有一定總結和分析問題的能力,對實驗中出現的意外情況能及時妥善解決。
2:使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要。
3:仔細閱讀說明書,嚴格按照說明書要求進行規范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,反復試驗確定成立后才能改進。
4:洗滌*,如若洗板不*,酶結合物本底顯色會呈現假陽性。洗滌液要新鮮,現用現配,陳舊的洗滌液會出現本底增高現象,也可能出現假陽性。
5:嚴控反應時間,反應時間過長,酶失活;反應時間過短,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假陰性。
6:注意小鼠IgA類單克隆抗體腹水純化試劑盒保存期,過保存期的試劑不能使用。
7:評估試劑的實用性,試劑的穩定與否,對準確率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品反復比照試驗,判定試劑符合要求后方可使用。
8:嚴格掌握顯色時間,顯色時間過短,加入終止液反應終止后,底物結合物的量過少,易出現假陰性。超過顯色要求時間后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,不可報陽性,這可能是本底顯色的結果。
9:加樣要準確、快速。如果加樣不準確,酶生成物的量不能確定,直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關,所以加樣應慎重。要求在一定時間內加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,便出現誤差,而且試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,保存期會縮短甚至失效。