產品名稱: 人白介素1受體拮抗劑(IL1RA)
產品時間: 2019-01-03
產品型號:
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產品特點: 尊敬的客戶,感謝你選用本公司的產品。本產品適用于體外定量檢測人血清、血漿或細胞培養上清液、組織等中天然和重組的白介素1受體拮抗劑(IL1RA) 濃度。
詳細介紹
【白介素1受體拮抗劑洗滌方法】
1.自動洗板機:要求注入的洗滌液為350μl,注入與吸出間隔20-30秒。確保機器運用熟練后,再投入實驗中使用。
2.手工洗板:每孔加洗滌液350μl,靜置30秒后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干。手工洗板時,注意加入洗液的過程中,不要造成孔間污染,從而出現跳孔的現象。
【白介素1受體拮抗劑操作步驟】
- 從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條,未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內封存于2-8℃。
- 預留空白孔(若使用雙波長讀板,空白孔可以不設)。
- 分別將標本或不同濃度人RANKL標準品(0pg/ml孔加標準品稀釋液)加入相應孔中(100μl/孔),用封板膠紙封住反應孔,37℃孵箱孵育90分鐘。
- 提前30分鐘制備生物素化人RANKL抗體工作液。
- 洗板3次。
- 加入生物素化人RANKL抗體工作液(100μl/孔)。用封板膠紙封住反應孔,37℃孵箱孵育60分鐘。
- 提前30分鐘制備酶結合物工作液。室溫避光放置。
- 洗板3次。
- 除空白孔外,加入酶結合物工作液(100μl/孔)。用封板膠紙封住反應孔,37℃孵箱,避光孵育30分鐘。
- 洗板5次。
- 加入TMB顯色工作液(包括空白孔)100μl/孔,37℃孵箱,避光孵育,當標準曲線高濃度的顏色較深,有明顯的顏色梯度的時候,即可終止。試驗顯色反應請勿超過30分鐘。
- 加入終止液(包括空白孔)100μl/孔,混勻后即刻測量OD(450nm)值(10分鐘內)。
【結果判斷】
1.每個標準品和標本的OD值應減去零孔的OD值。(若不減零孔值,標準曲線的零孔應相交于Y軸)
2.手工繪制標準曲線。以標準品濃度作橫坐標,OD值作縱坐標,以平滑線連接各標準品的坐標點。通過標本的OD值可在標準曲線上查出其濃度。使用專業制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3進行結果計算。
3.若標本OD值高于標準曲線上限,應適當稀釋后重測,計算濃度時應乘以稀釋倍數。
注意:本圖僅供參考,應以同次試驗標準品所繪標準曲線來計算標本含量。
【操作程序總結】
準備試劑,樣品和標準品
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